Fiche dactivité n°1 (saisir des
informations)
Comprendre laction des enzymes de
restriction
En 1962 étaient découvertes les premières enzymes de
restriction. Il sagit dendonucléases, dorigine bactérienne, qui
coupent la molécule dADN au niveau de sites spécifiques, les sites de restriction,
définis par une séquence nucléotidique particulière. Les fragments dADN double
brin produits, ou fragments de restriction, ont ainsi une taille bien définie. On a
depuis isolé une centaine de ces enzymes.
| Séquences nucléotidiques reconnues par quelques nucléases de
restriction courrantes. |
Endonucléase associée à un tétra-nuclotide dADN. |
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1- A partir de ces quelques informations,
discutez la notion de spécificité daction des enzymes.
2- Combien de fragments de restriction vont être produits par une enzyme
de restriction que lon fait agir sur un plasmide (molécule dADN circulaire)
possédant 2 sites pour cette enzyme ? Sur lADN linéaire dun phage possédant
4 sites pour cette enzyme ?
3- Quelle est la probabilité dapparition du site de restriction
EcoR I, composé dune séquence de 6 bases GAATTC, sur une séquence quelconque
dADN ?
4- Le virus bactériophage lambda possède un ADN de 45 kb (pb : paire de
base, 1 kb = 1000 pb). Combien peut-on statistiquement prévoir de sites de restriction
sur cet ADN pour EcoR I ?

Réponses attendues
2- 2 et 5
3- 1 / (4)6 = 1 / 4096
4- environ 45000/4096 =10 |
