Fiche d’activité n°1 (saisir des informations)

Comprendre l’action des enzymes de restriction

 En 1962 étaient découvertes les premières enzymes de restriction. Il s’agit d’endonucléases, d’origine bactérienne, qui coupent la molécule d’ADN au niveau de sites spécifiques, les sites de restriction, définis par une séquence nucléotidique particulière. Les fragments d’ADN double brin produits, ou fragments de restriction, ont ainsi une taille bien définie. On a depuis isolé une centaine de ces enzymes.

Séquences nucléotidiques reconnues par quelques nucléases de restriction courrantes. Endonucléase associée à un tétra-nuclotide d’ADN.
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1- A partir de ces quelques informations, discutez la notion de spécificité d’action des enzymes.
2- Combien de fragments de restriction vont être produits par une enzyme de restriction que l’on fait agir sur un plasmide (molécule d’ADN circulaire) possédant 2 sites pour cette enzyme ? Sur l’ADN linéaire d’un phage possédant 4 sites pour cette enzyme ?
3- Quelle est la probabilité d’apparition du site de restriction EcoR I, composé d’une séquence de 6 bases GAATTC, sur une séquence quelconque d’ADN ?
4- Le virus bactériophage lambda possède un ADN de 45 kb (pb : paire de base, 1 kb = 1000 pb). Combien peut-on statistiquement prévoir de sites de restriction sur cet ADN pour EcoR I ?

Réponses attendues
2- 2 et 5
3- 1 / (4)6 = 1 / 4096
4- environ 45000/4096 =10

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