Réalisation de TP d'immunologie : généralités

La mise en place de TP d'immunologie doit tenir compte des circulaires officielles interdisant le travail sur les vertébrés vivants et sur le sang humain. Si le champ des manipulations possibles en est réduit, il est néanmoins possible de pratiquer, in vitro, des expériences ou démonstrations avec des réactifs ne posant aucun problème de sécurité.

Liste indicative de fournisseurs de réactifs :

Sanofi Pasteur, BP3, 92430 Marnes la coquette   Tel. 01 47 95 60 00
Biomérieux, BP 10, 69290 Craponne   Tel. 08 00 11 69 11
Sigma, BP 701, 38297 St Quentin Fallavier Cedex  Tel. 04 74 82 28 04

 

Deux options de travail

agglutination en microplaque

 
Plutot pour les démonstrations :
Travail en tube à hémolyse - Volume réactionnel 1 à 5 ml - Pipettes classiques 1 à 5 ml.
Plutot pour le travail sur postes élèves autonomes :
Travil sur plaque de microtitration - Volume réactionnel 20 à 200 µl - Micropipettes à volume variable.

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Intérêt de l'utilisation des plaques de microtitration
Les plaques de microtitration se présentent sous forme d’une série de puits de quelques mm de diamètre creusés dans une plaque de matière plastique.
La faiblesse des volumes réactionnels nécessaires présente un double intérêt:
     augmenter la sensibilité des réactions Ag-Ac et la rapidité des phénomènes immunitaires induits,
     réduire les coûts de la manipulation par une division par 20 des volumes réactionnels.
Toutefois l'achat de micropipettes à volume variable (environ 1000 F pièce) est nécessaire (elles peuvent être utilisées dans de nombreux autres TP de biologie moléculaire)

Bibliographie
Immunologie, Roitt/Brostoff/Male, Ed.DeBoeck Université, 1994.
Activités technologiques en immunologie, Joffin/Afonso, CRDP Aquitaine, 1994.

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